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實驗時怎樣才能挑選到適合自己試驗的抗體

更新時間:2023-05-11      點擊次數:488
  關于特異性的選擇:特異性的選擇首要需求考慮四個方面:蛋白特異性、實驗方法特異性、符號物的特異性、種屬特異性。
 
  1、蛋白特異性:針對需求檢測的蛋白查找抗體,幾個細節要差異,重組表達的蛋白和內源性蛋白的檢測,對抗體的要求是不相同的,留心檢查抗體闡明書的檢測闡明。假定重組蛋白不是全長表達,則需求留心抗體的免疫原區域是否在重組蛋白區域內。
 
  2、符號物的特異性一般根據實驗操作的實驗方法不會運用帶有符號的一抗,比方WB、IHC等,都是通過二抗類的試劑符號抵達效果出現的目的。
 
  可是根據儀器剖析的一些實驗,或許就會運用到直接符號的一抗,比方流式實驗。那么需求了解到自己行將運用的儀器能檢測到的熒光規模,不通的參數要求選擇對應的符號物。在免疫熒光雙標實驗中,需求選配不同的熒光物。
 
  3、實驗方法特異性:現在運用抗體的實驗方法有許多,不同的運用方法過程中,由于對蛋白樣品的處理方法不相同,蛋白的含量有差異,對抗體的辨認表位和效價要求都是不相同的。具體的根據闡明書注明的產品應用方法進行選擇。
 
  4、種屬特異性:同種蛋白不同物種,有著或大或小的差異?,F在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規劃多肽抗原的,根據蛋白的同源性的情況與其他種屬發作穿插反應。需求參照闡明書注明的可反應種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體,能夠通過蛋白的序列比對,選擇同源序列免疫的抗體。
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